T4 DNA-LIGASE CAS 9015-85-4

CAS: 9015-85-4
Molekulargewicht: 55,3kDa, Monomer
Sorte: BR
Quelle: Escherichia coli mit T4 Phage-Klon-Gen 30
Konzentration: 5Weiss U/ul (1000CEU/ul)
Aktivitätsdefinition: Bezieht sich auf die Menge des Enzyms, das benötigt wird, um 1nmol [32PPi] in die resorbierbare Form Norit innerhalb von 30 Minuten bei 37 Grad C in der ATP-PPI-Austauschreaktion umzuwandeln (weiss-Einheiten, 1 weiss-Einheit entspricht etwa 200 Klebeenden-Verbindungseinheit. 1 Klebeendverknüpfungseinheit: 20ul Reaktionssystem (50mm Tris-HCL (PH7,5), 10mm DTT, 10mm MgCl2, 1mm ATP, 25ug/ml BSA, 12um (300ug/ml) 5-DNA-Ende) , die Menge an Enzym erforderlich, um 50% des ligierten Lambda-DNA-Produkts zu ligieren, verdaut mit HindIII innerhalb von 30 Minuten bei 16 Grad C)
Enzymaktivität Analyse Gemisch: 66mm Tris-HCL (PH7,6), 10mm DTT, 6,6mm MgCl2, 0,066mM ATP, 3,3uM [32PPi]
Komponenten der Speicherlösung: 20mm Tris-HCL (PH7,5), 50mm KC1, 1mm DTT, 0,1mm EDTA und 50 % (V/V) Glycerin
10×T4 DNA-Ligase-Puffer (#B69): 400mm Tris-HCL, 100mm MgCl2, 100mm DTT, 5mm ATP (PH7,5, 25ºC)
Inhibitor: Wenn die Konzentration von NaC1 oder KC1 im Reaktionssystem 200 mm überschreitet, kann es die Aktivität von T4 DNA-Ligase stark hemmen
Inaktivierung: Erhitzen bei 65ºC für 10 Minuten oder 70ºC für 5 Minuten
Hinweis: Die Bindung von T4 DNA Ligase an DNA wird die Band Agarose Gel elektrophoretische Mobilität zu ändern. Um dieses Phänomen zu vermeiden, müssen Proben oder Molekulargewichtsstandards vor der Elektrophorese verarbeitet werden. Die Probenverarbeitung ist wie folgt: Die Probe wird mit Fermentas 6×DNA-beladungslösung (#R1151) gemischt, 75 Minuten lang bei 5 65 C oder 10 Minuten lang bei C erhitzt und in einem Eisbad gelagert; Während der Umwandlung darf das Volumen des Ligationsprodukts das Volumen der kompetenten Zellen 10% nicht überschreiten; vor der Elektrotransformation die T4 DNA-Ligase im Ligationgemisch durch Extraktionsmethode entfernen und dann das Extraktionsprodukt durch Ethanolausfällung reinigen
Qualitätskontrolle: Tests zeigen keine Endonuklease, Ribonuklease und Phosphatase Kontamination. Funktionstest: Die Fähigkeit, DNA mit klebrigen oder stumpfen Enden zu verbinden
Eigenschaften: Flüssig. Dieses Enzym katalysiert die Bildung einer Phosphodiesterbindung zwischen der benachbarten 5'Phosphat-Gruppe und 3'-Hydroxyl-Ende in doppelsträngiger DNA oder RNA und kann auch einsträngige Schnitte in doppelsträngigen DNA-, RNA- oder DNA/RNA-Komplexen reparieren. Die klebrigen und flachen Enden der DNA sind miteinander verbunden, aber das Enzym hat keine Enzymaktivität auf einsträngigen Nukleinsäuren. Dieses Enzym benötigt den Kofaktor ATP
Verwendung: Biochemische Forschung. Verknüpfung von doppelsträngiger oder stumpfer DNA mit klebriger oder stumpfer Endverbindung; doppelsträngiger Oligonukleotid-Linker mit doppelsträngiger DNA; Reparatur von Lücken in doppelsträngigen DNA-, RNA- oder DNA-RNA-Komplexen; Ligase-vermittelter RNA-Nachweis; Site-spezifische Mutation; Verstärkter Polymorphismus der Fragmentlänge
Lagerung: -20 Grad

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Q1: Sind Sie ein Hersteller?
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Q5:Was sind die Hauptkategorien der Produkte, die vom Unternehmen verkauft werden?

Antwort: Es  wird hauptsächlich  in biologischen und chemischen Reagenzien, einschließlich Enzymreagenzien , Proteine, Antibiotika, Pflanzenhormone , Nukleinsäuren ,  Pigmente, Aminosäuren , Vitamine, Kohlenhydrate, Puffer,  Tenside, Nährmedien und Trennung von Materialien und Kits.

Q6:beschäftigt sich das Unternehmen hauptsächlich mit kleinen Verpackungen oder großen Verpackungen?

Antwort: Hauptsächlich kleine Verpackungsreagenzien, große Verpackungen auch tun, spezifische können Kundendienstmitarbeiter fragen.

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